氯磷酸二鈉脂質(zhì)體由同心磷脂雙層構(gòu)成的人造球,該雙層包裹著含有氯膦酸鹽的PBS(磷酸鹽緩沖液)水溶液,脂質(zhì)體是顆粒,在PBS中形成懸浮液,在儲(chǔ)存時(shí)會(huì)沉淀,在試管或燒瓶的底部形成沉淀,在對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥之前,應(yīng)先搖晃懸浮液,以回收均勻的懸浮液。
一、作用原理:
兩親性磷脂分子在水中可以形成同心圓形式的磷脂雙分子層球體,磷脂雙分子層中間通過(guò)水相分隔。溶解在水溶液中的氯磷酸鹽在形成脂質(zhì)體的過(guò)程中被包裹進(jìn)磷脂雙分子層之間的水相中,游離的氯磷酸鹽不能自由的通過(guò)脂質(zhì)體的磷脂雙分子層。隨著氯磷酸二鈉脂質(zhì)體被巨噬細(xì)胞吞噬,在巨噬細(xì)胞溶酶體磷酸酶的作用下,溶解在脂質(zhì)體水相中的氯磷酸鹽就可以被逐步釋放出來(lái),并累積在細(xì)胞內(nèi),當(dāng)其達(dá)到一定濃度時(shí),巨噬細(xì)胞將會(huì)受到不可逆轉(zhuǎn)的損傷,從而進(jìn)入凋亡過(guò)程。
二、使用方法:
(1)將小鼠放在倒扣的飯盒內(nèi),從孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2條動(dòng)脈和3條靜脈,2條動(dòng)脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面,3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側(cè)的靜脈;隔日尾靜脈注射200μl產(chǎn)品。
(2)行尾部靜脈注射時(shí),以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出約2cm一段,使皮膚緊張,靜脈更為充盈,右手持1ml針頭注射器,使針頭與靜脈平行(小于30°角),從尾巴的下1/4處進(jìn)針,開(kāi)始注入藥物時(shí)應(yīng)緩慢,仔細(xì)觀察,如果無(wú)阻力,無(wú)白色皮丘出現(xiàn),說(shuō)明已刺入血管,可正式注入藥物。
(3)有的實(shí)驗(yàn)需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥,注射部位應(yīng)盡可能從尾端開(kāi)始,按次序向尾根部移動(dòng),更換血管位置注射給藥。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求制定注射日程,通過(guò)免疫組化或流式檢測(cè)巨噬細(xì)胞去除效率。